این اولین کتاب در مورد میکروسکوپ نیروی اتمی با سرعت بالا (HS-AFM) برای دانشجویان و زیست شناسانی در نظر گرفته شده است که می خواهند از HS-AFM در تحقیقات خود استفاده کنند. توضیحات سرراستی از اصل و تکنیک های AFM و HS-AFM ارائه می دهد. نمونه های متعددی از مطالعات HS-AFM روی پروتئین ها نشان می دهد که چگونه می توان این شکل جدید میکروسکوپ را برای مشکلات بیولوژیکی خاص به کار برد. چندین اقدام احتیاطی برای تصویربرداری موفق و آمادهسازی نوکهای کنسول و سطوح زیرلایه برای کاربرانی که برای اولین بار از HS-AFM استفاده میکنند بسیار سودمند خواهد بود. به نوبه خود، می توان از تکنیک های ابزار دقیقی که در فصل 4 توضیح داده شد صرف نظر کرد، اما برای مهندسان و دانشمندانی که می خواهند نسل بعدی میکروسکوپ های کاوشگر روبشی پرسرعت را برای زیست شناسی توسعه دهند مفید خواهد بود.
این کتاب به منظور تسهیل استفاده برای اولین بار از این روش جدید و الهام بخشیدن به دانشجویان و محققان برای مقابله با مشکلات زیستی خاص خود با مشاهده مستقیم رویدادهای پویا که در دنیای نانوسکوپی رخ می دهد، در نظر گرفته شده است. میکروسکوپ در زیست شناسی اخیراً با ظهور میکروسکوپ نیروی اتمی پرسرعت (HS-AFM) وارد عصر جدیدی شده است. برخلاف میکروسکوپ نوری، میکروسکوپ الکترونی و AFM آهسته معمولی، این امکان را به ما می دهد که مستقیماً مولکول های بیولوژیکی را در محیط های فیزیولوژیکی مشاهده کنیم. «فیلمهای» مولکولی که با استفاده از HS-AFM ایجاد میشوند، میتوانند مستقیماً نحوه رفتار و عملکرد مولکولها را بدون نیاز به تحلیلهای پیچیده بعدی و تفسیرهای دور نشان دهند. همچنین به ما اجازه می دهد تا به طور مستقیم تغییرات مورفولوژیکی در سلول های زنده و رویدادهای مولکولی پویا را که روی سطوح باکتری های زنده و اندامک های درون سلولی رخ می دهند، نظارت کنیم. از آنجایی که ابزارهای HS-AFM اخیراً تجاری شده اند، در آینده نزدیک انتظار می رود HS-AFM به یک ابزار رایج در زیست شناسی تبدیل شود و درک ما از پدیده های بیولوژیکی را تقویت و تسریع کند.
تصویربرداری با وضوح فوق العاده از ساختارهای عصبی ظریف. (الف) مقایسه تصویر 2P در مقابل 2P-STED از خارهای دندریتی که در هیپوکامپ موش در داخل بدن تصویر شده است (اقتباس شده از مرجع 36). (ب) تصویر همبستگی STED و SMLM از مورفولوژی ستون فقرات دندریتی و آرایش فضایی پویا پروتئین های سیناپسی (آبی، مورفولوژی عصبی؛ سبز، پروتئین داربست PSD-95؛ مسیرهای رنگی، زیر واحد گیرنده GluA1)، نوار مقیاس 500 نانومتر (اقتباس از Ref. 37). (ج) تصویربرداری سایه با وضوح فوقالعاده (SUSHI) از بافت مغز، که زمینه تشریحی یک نورون نشاندار شده با YFP را نشان میدهد (اقتباس شده از مرجع 38).
خلاصه
مزوسکوپی اپتوآکوستیک (OAM) کنتراست آناتومیک و عملکردی را در داخل بدن در اعماق غیر قابل حل با میکروسکوپ نوری بازیابی می کند. پیشرفتهای اخیر در الگوریتمهای بازسازی، عملکرد تصویربرداری آن را برای ارائه وضوح جانبی بالا که در نهایت توسط پراش صوتی محدود میشود، بیشتر کرده است. در این کار، یک چارچوب OAM مبتنی بر مدل پهن باند جدید (MB-OAM) که به طور موثر از تقارنهای اسکن برای عملکرد بهبودیافته استفاده میکند، ارائه شده است. با استفاده از پهنای باند تشخیص بزرگ یک فیلم کروی پلی وینیلیدین دی فلوراید در حالی که پاسخ تکانه فضایی آن را به طور دقیق محاسبه می کند، رویکرد جدید به طور قابل توجهی از اجرای استاندارد OAM از نظر کنتراست و وضوح بهتر عمل می کند، همانطور که توسط آزمایش های کاربردی in vivo در موش ها و داوطلبان انسان تایید شده است. علاوه بر این، منظمسازی هنجار L1، ساختارهایی را که با وضوح کمتر از تفکیک محدود پراش نظری از هم جدا شدهاند را قادر میسازد. این عملکرد منحصر به فرد آنژیوگرافی بدون برچسب، کاربرد کلی MB-OAM را به عنوان یک روش تصویربرداری بافت عمیق با وضوح فوق العاده که قادر به شکستن محدودیت های تحمیل شده توسط پراش صوتی است را نشان می دهد.
رویکردهای کمی برای آسیب شناسی
پیشرفت در دستگاه ها و روش ها
عوامل کنتراست جدید، گزارشگران، پروب ها، مولکول ها
روش های تحویل پروب و برچسب گذاری
پاکسازی نوری، انبساط بافت
هیبریداسیون درجا، رونویسی فضایی، حفظ اسیدهای نوکلئیک
میکروسکوپ نوری ارگانوئیدها و بافت های مهندسی شده
در زیست شناسی ، بافت یک سطح سازمانی سلولی بین سلول ها و یک اندام کامل است. یک بافت مجموعه ای از سلولهای مشابه و ماتریس خارج سلولی آنها از یک منبع است که با هم عملکرد خاصی را انجام می دهند. سپس اندامها با گروه بندی عملکردی چندین بافت تشکیل می شوند.
معرفی
انگیزه بیوفیزیک
منظور ما از "جعبه ابزار" چیست؟
تشریح فصل های بعدی این کتاب
بار دیگر ، به نقض
نکات خلاصه
سوالات
منابع
فیزیک با الهام از نظر بیولوژیکی یک حوزه فوق العاده گسترده است که رفتار سیستمها از ماشینهای تک مولکولی تا موجودات زنده ، اکوسیستمها و تکامل را پوشش می دهد. ما از ابزارهای فیزیک برای حل مشکلات بیولوژیکی و از زیست شناسی برای ایجاد ابزارهای جدید فیزیک استفاده می کنیم. کار ما در رابط بین رشته ها بر پزشکی و مراقبت های بهداشتی و همچنین علوم و صنایع بیولوژیکی و فیزیکی تأثیر می گذارد.